Zeocin即phleomycin D1,中文名称博来霉素或者腐草霉素D1,是从轮状链霉菌(Streptomyces verticillus)的一个突变体菌株中分离而来的博来霉素/腐草霉素(bleomycin/phleomycin)的抗生素家族成员。它对细菌、真菌(包括酵母)、植物和哺乳动物细胞均有抑制作用和细胞毒性。
Zeocin是一种碱性、水溶性的、铜离子螯合的糖肽抗生素。Cu2+螯合的Zeocin溶液呈现蓝色,无活性。当其进入细胞后,Zeocin上的Cu2+被还原为一价铜离子(Cu+),并被细胞内的巯基化合物(sulfhydryl compound)清除,导致Zeocin被活化,能够结合到细胞内DNA上并使其断裂,最终导致细胞死亡。
对Zeocin产生抗性的蛋白是来源于印度链球菌(Streptoalloteichus hindustanus)的Sh ble基因编码一种14kDa大小的蛋白,它能够以一定比率结合Zeocin,使其不能结合细胞DNA,抑制其DNA断裂活性,从而使细胞对Zeocin产生抗性。因此,Zeocin可用来筛选表达Zeocin抗性基因的多克隆或单克隆细胞,或用于相应的多克隆或单克隆细胞的维持性培养。
Zeocin对于绝大多数好氧细胞均有效,常用于细菌(如大肠杆菌)、真核微生物(如酵母)及动植物细胞的筛选。大肠杆菌筛选推荐浓度为25~50μg/ml (低盐LB培养基,NaCl浓度不能超过5g/L);酵母筛选推荐浓度为50~300ug/ml (YPD或基本培养基);哺乳动物细胞筛选推荐浓度为50~1000ug/ml (合适培养基,根据细胞系的类型而不同)。实际应用时,应针对不同的细胞系测试Zeocin的浓度梯度,以确定最佳使用浓度。
保存条件:
-20℃避光保存,至少一年有效。20mg/ml溶液包装适当避免反复冻融。
注意事项:
Zeocin人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
Zeocin对光敏感,需避光保存于-20℃。含有该抗生素的平板或培养基也需避光保存。
高离子强度、酸或碱性都会抑制Zeocin的活性,该抗生素在过高或过低pH及弱氧化剂的条件下不稳定,且变性不可逆。在培养细菌时,需适当降低细菌培养基的盐浓度(低盐LB培养基,NaCl浓度不能超过5g/L)并调整pH至7.5,从而使其保持活性。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。